pMAD质粒是大肠杆菌和一些革兰氏阳性菌的穿梭质粒，包括金黄色葡萄球菌、单核细胞李斯特菌、枯草芽孢杆菌等。pMAD质粒全长9666bp，含有革兰氏阳性菌的温度敏感型复制起始位点、氨苄青霉素抗性基因和红霉素抗性基因（erm），并含有一个耐热的β-半乳糖糖苷酶基因（bgaB）。

pMAD质粒可用于对一些革兰氏阳性菌的基因进行失活突变。在含X-Gal的平板上，可通过蓝白斑的方法快速筛选质粒丢失菌株。在大肠杆菌中，pMAD质粒呈多拷贝，氨苄青霉素抗性表型。在葡萄球菌等革兰氏阳性菌中，pMAD质粒呈温度敏感型复制起始，红霉素（erythromycin）或林可霉素（lincomycin）抗性表型。